什么是样本溶血?
样本溶血是指在血液样本的采集、处理、储存或运输过程中,由于内外因素导致红细胞破裂,红细胞中血红蛋白逸出,从而使血清或血浆变为血红色的现象。
溶血样本可能对ELISA实验造成怎样的影响?
溶血会导致血细胞内血红蛋白的释放,血红蛋白具有类似过氧化物酶的活性,这可能会在以辣根过氧化物酶(HRP)为标记酶的ELISA测定中增加非特异性显色,影响实验结果的准确性;溶血样本中的红细胞碎片和其他细胞成分可能会干扰ELISA检测中的化学反应和比色分析,导致检测结果偏差,使得实验结果无法准确反映样本中抗原的真实浓度。
针对实验中可能遇到的样本溶血,我们提供如下预防或处理建议:
1. 规范采血操作:使用适合取样的针头,避免过度抽吸,确保采血过程中的平稳操作;
2. 轻柔处理样本:在样本的混合和处理过程中,动作要轻柔,避免剧烈震荡样本;离心处理时不宜转速过大或时间太长;
3. 合适的保存和运输条件:确保样本在适当的温度条件下保存和运输,避免高温或低温环境,并避免样本受到剧烈摇晃或冲击;
4. 使用高质量、规范的采血工具和储存容器;
5. 及时分离血清或血浆:在采血后尽快进行离心分离,全血需尽快处理成血清/血浆样本,全血不可冻融,以减少红细胞破裂的机会;
6. 避免反复冻融:样本应一次性使用,避免反复冻融,因为这会导致蛋白质降解和细胞破裂。
若样本溶血轻微(浅红色),仍可进行ELISA检测,建议适当增加洗板次数,减少背景过高影响,实验后将溶血与非溶血样本进行对照试验,判断是否有影响,并做好相应记录;若溶血严重(深红色),建议重新取样。
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