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产品概述
QuantiCyto® Human Siglec-5/Siglec-14 ELISA kit
Human
23.5 pg/ml
47-3000 pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Siglec-5/Siglec-14浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组人Siglec-5/Siglce-14。
与Siglec-3/Fc Chimera、Siglec-7/Fc Chimera、Siglec-9/Fc Chimera无明显交叉反应。
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法 ： 抗人Siglec-5/Siglce-14单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人Siglec-5/Siglce-14会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Siglec-5/Siglce-14抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人Siglec-5/Siglce-14抗体与结合在单抗上的人Siglec-5/Siglce-14结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人Siglec-5/Siglce-14，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，人Siglec-5/Siglce-14浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人Siglec-5/Siglce-14的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 3 ng/支×2 支 | 3 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 体稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.064 | 0.065 | 0.065 | |
| 46.9 | 0.110 | 0.114 | 0.112 | 0.048 |
| 93.8 | 0.150 | 0.157 | 0.154 | 0.089 |
| 187.5 | 0.247 | 0.255 | 0.251 | 0.187 |
| 375 | 0.442 | 0.438 | 0.440 | 0.376 |
| 750 | 0.803 | 0.800 | 0.802 | 0.737 |
| 1500 | 1.449 | 1.462 | 1.456 | 1.391 |
| 3000 | 2.426 | 2.438 | 2.432 | 2.368 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Siglec-5/Siglec-14的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 平均值（pg/ml） | 1752.3 | 553.1 | 100.8 | 1688.5 | 489.3 | 88.9 |
| 标准差 | 138.4 | 42.6 | 7.6 | 135.1 | 38.2 | 6.8 |
| 变异系数（%） | 7.9 | 7.7 | 7.5 | 8.0 | 7.8 | 7.6 |
科研工具箱
别称
① SIGLEC5, CD170, CD33L2, OB-BP2, OBBP2, SIGLEC-5, sialic acid binding Ig like lectin 5 ② SIGLEC14, sialic acid binding Ig like lectin 14
基因ID
External Ids for SIGLEC5 Gene：HGNC: 10874 NCBI Gene: 8778 Ensembl: ENSG00000268500 OMIM®: 604200 UniProtKB/Swiss-Prot: O15389； External Ids for SIGLEC14 Gene：HGNC: 32926 NCBI Gene: 100049587 Ensembl: ENSG00000254415 OMIM®: 618132 UniProtKB/Swiss-Prot: Q08
功能
唾液酸结合免疫球蛋白型凝集素（Sialic acid-binding immunoglobulin-type lectins, Siglecs）是结合唾液酸的细胞表面蛋白。它们主要存在于免疫细胞表面，是I型（Ig型）凝集素的一个子集。在哺乳动物中有14种不同的Siglecs，根据细胞表面受体-配体相互作用提供一系列不同的功能。这14种Siglecs主要分为两类：一类在哺乳动物中高度保守，包括Siglec-1/CD169/Sialoadhesin、Siglec-2/CD22、Siglec-4/髓鞘相关糖蛋白 （myelin-associated glycoprotein, MAG)和 Siglec-15；另一类结构与 CD33高度相似，因此统称为“CD33相关Siglecs”，包括Siglec-3/CD33、Siglec-5、Siglec-6、Siglec-7、Siglec-8、Siglec-9、Siglec-11、Siglec-XⅡ、Siglec-14、Siglec-16。其他如Siglec-8 和 Siglec-9 在小鼠和大鼠中具有同源物（分别为Siglec-F和Siglec-E）。 Siglecs家族的主要功能是与含有唾液酸的糖结合，这些受体-聚糖相互作用可参与细胞粘附、细胞信号传导等过程中。大多数的Siglecs因其细胞内免疫受体酪氨酸基抑制基序（Immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif, ITIM）结构域在细胞信号中发挥抑制作用，抑制免疫细胞的激活。结合配体后，Siglecs通过其ITIM结构域招募抑制蛋白（如SHP磷酸酶），导致细胞蛋白去磷酸化，从而下调激活的信号通路。 Siglec-14在其跨膜区域含有精氨酸残基，该残基与含有ITAM的衔接蛋白DNAX激活蛋白DAP10和DAP12结合。当Siglec-14与其配体结合时，Siglec-14通过DAP10和DAP12蛋白激活细胞信号通路。这些蛋白质上调涉及许多细胞蛋白的磷酸化级联反应，导致细胞活化。Siglec-14似乎与Siglec-5共定位，后者抑制细胞信号通路，二者在免疫细胞中协调相反功能。
研究领域
免疫学;信号转导;
