条件培养基（conditioned medium）指的是将培养过细胞的培养基除细胞取得的上清液，可用于分析、培养其他细胞或作为其他细胞培养基的添加成分。
将条件培养基用于ELISA分析时，操作如下：
1. 将细胞置于完全（含血清）生长培养基中，使细胞增殖至所需的融合水平。
2. 去除生长培养基，用几毫升温PBS轻柔地清洗。重复清洗步骤。
3. 去除最后一次PBS洗涤液，加入无血清生长培养基。孵育 1-2 天。
4. 移取培养基至离心管中，以合适的转速离心5-10 min。
5. 立即用于实验或将上清液分装保存。尽量减少冻融循环。
本篇样本处理方法旨在作为一般参考，具体方案因样本类型而异，需要您根据参考文献并自行验证决定，从而选择更适合自己样本的处理方案。
以下提供部分样本处理案例：
小鼠巨噬细胞炎症反应分析（来源：Bio-protocol）
收集用于测定细胞因子产生的条件培养基
1. 在收集由巨噬细胞调节的培养基之前，观察培养物，验证相关细胞是否被适当激活（图1所示） 注意：用LPS刺激的J774A.1巨噬细胞看起来比未刺激的巨噬细胞更大，更扁平。
图1：巨噬细胞形态对 LPS 的反应变化。未经处理的巨噬细胞（左）和LPS刺激 18 小时的巨噬细胞（右）的明场图像。比例尺=50 µm
2. 收集培养基，并将其置于1.5ml微量离心管中。
3. 以500×g/转速，室温下（RT）离心样品5 min。
4. 将离心后的上清液转移到新的1.5ml试管中。
注意事项：A)虽然细胞沉淀不应该可见，但是在去除上清液时，应避免（枪头等仪器耗材）接触管底。B)样品可立即用于ELISA测定，或分装保存于-80℃。
5. 按照供应商提供的说明进行ELISA实验。
参考文献
Bartosh, T. J. and Ylostalo, J. H. (2014). Macrophage Inflammatory Assay. Bio-protocol 4(14): e1180. DOI: 10.21769/BioProtoc.1180.
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