组织样本处理方法因样本类型而异。
切割样本后，称取重量。使用 PBS 清洗除去多余血液后，加入含有蛋白酶抑制剂的 PBS或裂解缓冲液，通过手工匀浆、机械匀浆或超声破碎的方法将标本匀浆充分。离心去除组织碎片，仔细收集上清并分装，冷冻备用，避免反复冻融。 组织匀浆液在用于ELISA检测前需定量总蛋白。
本篇样本处理方法旨在作为一般参考，具体方案因样本类型而异，需要您根据参考文献并自行验证决定，从而选择更适合自己样本的处理方案。
以下提供部分样本处理案例：
小鼠脑组织匀浆制备（来源：Bio-protocol）
图 1
1. 灌注后，将小鼠处死，分离头部，用镊子剥离头骨。
2. 将大脑切片（图 1A-C）。
3. 将脑组织收集到装有200 µl裂解缓冲液的取样管中（图 1D）。
裂解缓冲液配方（原作者提供配方如下，仅供参考） |
20 mM Tris/HCl (pH 7.4) Dissolve Tris (hydroxymethyl) aminomethane in distilled water and regulate pH by HCl 150 mM NaCl 1% (v/v) NP-40 0.5% (v/v) deoxycholic acid 0.1% (w/v) SDS 0.5% (w/v) EDTA 2 mM phenylmethylsulfonyl fluoride 10 µg/ml aprotinin |
4. 通过超声破碎仪Digital Sonifier®, Branson（model: 250D），设置20 kHz, 200 W（原作者提供）将脑组织超声破碎。
5. 将所得裂解物在4℃下15,000×g离心10 min。
6. 使用取样管收集上清液（图1G）。
参考文献
Michinaga, S. and Koyama, Y. (2015). ELISA Detection of Endogenous Serum Albumin in the Mouse Brain: A Measure of Extravasation Following Brain Injury. Bio-protocol 5(9): e1469. DOI: 10.21769/BioProtoc.1469.
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