走近指标：TGF-β1
（图1：TGF-β1结构图）
TGF-β1(Transforming growth factor-β1)是一类在结构和功能上具有某些特点的多肽因子家族。该家族包括同二聚体从TGF-β1至TGF-β5，异二聚体有TGF-β1、2。TGF-β1以非活性状态存在，激活时是TGF-β1活性部分的释放。在体外，TGF-β1的活化是对其酸化。TGF-β1具有激活和抑制双重功能。许多TGF-β1的受体调节其生物活性，有受体I(53-65KD)，受体II(83-110KD)，受体III(250-310KD),受体IV(60KD),受体V(400KD)。TGF-β1是一种多功能细胞生长调节蛋白，TGF-β最初由血小板中分离出来，后发现在许多组织中均可表达。TGF-β是多肽家族成员，包括5种形式(1～5)。TGF-β、骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)和激动剂A(activin A)有相近的分子结构，因此它们有可能由同一原始基因演变而来。TGF-β刺激未转化成骨细胞(untransformed osteoblastic cell)DNA的合成和细胞的增殖，其对成骨细胞分化功能的作用也因细胞处于不同的分化阶段而不同。有研究表明，TGF-β对骨吸收有双重作用——既抑制又促进。它参与了胚胎的发育、损伤组织的修复、肿瘤的发生和发展等生理病理过程，是目前众多学科的研究热点。
为什么检测TGF-β需要活化样本？
（图2：活性TGF-βs的合成与释放过程1）
TGF-β最初以非活性前体形式(latent TGF-β，L-TGF-β)被合成和分泌，包含信号肽、前结构域和成熟多肽。信号肽被去除后，前体分子通过碱性残基的蛋白水解裂解进一步加工，产生成熟的同型或异型二聚体配体。
潜伏的TGF-β复合物可以通过与潜伏TGF-β结合蛋白(LTBP)形成二硫键，结合成一个潜伏复合物(LLC)，这使得潜伏的TGF-β能够稳定储存而不是进一步激活。此外，潜伏的TGF-β还可以与调节性T细胞(Treg)或巨噬细胞表面的跨膜糖蛋白A为主的重复序列蛋白(GARP)和LRRC33结合。在LAP上的Arg-Gly-Asp(RGD)序列与整合素αvβ6或αvβ8相互作用后，TGF-β才能从其潜伏复合物中变构释放。只有从潜伏复合物中释放出来，TGF-β才能具有活性并激活其受体。
在体外，非活性状态的TGF-β通过酸处理可被活化。
使用欣博盛生物TGF-β1 ELISA试剂盒时，如何预处理样本？
欣博盛生物TGF-β1 ELISA试剂盒，相比其他指标试剂盒额外提供专门用于活化样本的激活液（A液）与终止液（B液）两种组分，针对不同的标本提供参考活化方式如下：
血清或血浆标本激活方法:
a.在225ul标准品&标本通用稀释液中，加入5μl血清或血浆标本。
b.加10ul A液（激活液），盖紧，上下混匀。2－8℃放置60±2分钟。
c.加10ul B液（终止液），盖紧，上下混匀。（总体积250ul即50倍稀释）
d.即用，或置-20/-70℃可保存3天。计算结果时应乘以稀释倍数。
（注意：不同的标本TGF-β1的水平可能有较大差异,请根据实际情况灵活掌握稀释度，不同浓度稀释仅需要改变稀释液体积）
细胞培养上清标本激活方法:
a.在80ul标准品&标本通用稀释液中，加入100μl标本。
b.加10ul A液（激活液），盖紧，上下混匀。2－8℃放置60±2分钟.
c.加10ul B液（终止液）， 盖紧，上下混匀。（总体积200ul即2倍稀释）。
d.即用，或置-20/-70℃可保存3天。计算结果时应乘以稀释倍数。.
（注意：不同的标本TGF-β1的水平可能有较大差异，请根据实际情况灵活掌握稀释度，不同浓度稀释仅需要改变稀释液体积）
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货号 | 产品名称 | 灵敏度 | 检测范围 |
0.78pM | 1.56-100pM | ||
15.6pg/ml | 31.25-2000pg/ml | ||
15.6pg/ml | 31.25-2000pg/ml | ||
15.6pg/ml | 31.25-2000pg/ml | ||
15.6pg/ml | 31.25-2000pg/ml | ||
15.6pg/ml | 31.25-2000pg/ml |
参考文献
1. Zhao H, Wei J, Sun J. Roles of TGF-β signaling pathway in tumor microenvirionment and cancer therapy[J]. International Immunopharmacology, 2020, 89: 107101.
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