ELISA实验标准曲线吸光值、梯度挺好,但是样本值不佳,样本浓度太低或太高,总结原因如下:
可能原因:
1.标曲选择不适合
解决方法:选择最合适的标曲拟合。
2.样本含量很低,低于灵敏度 无法被检测到
解决方法:尝试浓缩样本或使用高敏ELISA试剂盒检测。
3.样本含量很高,超过标曲
建议进行预实验摸索稀释倍数,确保样本OD值落在标曲范围内。
ELISA 实验结果重复性不好,可能的原因:
1.微量加样不准确
解决方法:保证微量加样的准确性和均一性,定期校准移液器。
2.样品不均一
解决方法:加样前充分混匀样品,取样确保移液位置一致。
3.加样量不一致
解决方法:样品稀释前应充分混匀,尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。
4.孔与孔之间的交叉污染
解决方法:孵育后取下盖子小心操作,避免孔与孔的污染;封板膜不能重复使用。
5.边缘效应 (外周孔显色较中心孔深)
解决方法:孵育时尽量100 RPM旋转混匀。
6.包被板表面遭到破坏
解决方法:洗板加样时尽量小心,避免破坏板的包被表面。
欣博盛生物温馨提醒您:在做ELISA实验时,请根据产品说明书进行操作,如操作过程中有误,请咨询我们的技术人员,协助处理您的问题。