ELISA实验中，洗涤步骤通常在每次抗体或抗原孵育后进行，通过洗涤步骤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中可能非特异性地吸附于固相载体干扰物质。
因此，优化ELISA操作步骤的重点之一在于洗涤，不充分的、操作失误的洗涤将导致较差的重复性、交叉污染或高背景。一次常规的ELISA实验过程中，一般包含两个或以上的孵育步骤，中间以洗涤步骤隔开，可能需要2-3次的洗涤。如何进行洗板，又优化洗板步骤，从而使得实验数据更加精准可靠呢？
常见的洗板法分为手工洗板法与自动洗板机法，二者没有绝对的优劣区分，只要相关实验人员操作严谨、步骤合乎要求，均能得到可靠的数据结果。
→自动洗板机
自动洗板机速度快，引入的人为因素少，速度快，条件恒定，是实验室经常使用的洗板方法，但是由于洗板机的特点，每次洗板后不能拍干，故会有较多的液体残留，需通过增加洗板次数来减少这种误差。
洗涤参数与洗涤次数：影响洗涤效果的主要参数是洗涤循环的量。洗涤次数越多，背景越低，但太多次的洗涤会降低信号强度，使其难以测定。对于商业化ELISA试剂盒，洗板的次数在试剂盒研发测试阶段已经进行了测试，可根据随货说明书的建议设置洗板机的洗涤参数。
抽吸：抽吸的参数会影响洗涤步骤的效果。这些参数包括吸液高度和吸入位置，这两者都能调整，以降低背景（残留量）和差异。因此，洗板后需要手动拍去酶标板中残留液体。
以欣博盛ELISA试剂盒为例，要求注入的洗涤液为350 ul，注入与吸出间隔30－60秒，洗板5-6次（以随货说明书要求为准）。
→手工洗板
没有自动洗板机的情况下，可手动洗涤酶标板。
以欣博盛ELISA试剂盒为例，要求甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350 ul，静置30秒后甩尽液体，在厚迭吸水纸上拍干。洗板5次。
手工洗板小贴士：
戴好手套、穿好防护服，注意实验环境清洁到位。
悬空加入洗液，洗涤全程不要触碰到实验孔。
如果无法保证倾倒洗涤液时不发生串孔现象，尽量选择用移液器将洗涤液单独吸出。
为防止孔间污染，每一次拍板前，吸水纸都要更换。
ELISA实验步骤每一步看起来很简单，但是在实际操作过程中，还是应该仔细操作每一个步骤，包括常被忽视的洗涤步骤，才能获得更准确的结果。
