产品概述
QuantiCyto® Human MIF ELISA kit
Human
31.3 pg/ml
62.5-4000 pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human MIF浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组人MIF。
与重组人IFN-γ、IL-4,重组小鼠MIF因子无明显交叉反应。
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人MIF单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人MIF会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人MIF抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人MIF抗体与结合在单抗上的人MIF结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人MIF,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人MIF浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人MIF的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 2 ng/支×2 支 | 2 ng/支×3 支 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
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已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
体稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。
相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.070 | 0.071 | 0.071 | |
62.5 | 0.131 | 0.127 | 0.129 | 0.059 |
125 | 0.179 | 0.174 | 0.177 | 0.106 |
250 | 0.280 | 0.276 | 0.278 | 0.208 |
500 | 0.460 | 0.450 | 0.455 | 0.385 |
1000 | 0.800 | 0.795 | 0.798 | 0.727 |
2000 | 1.381 | 1.367 | 1.374 | 1.304 |
4000 | 2.392 | 2.374 | 2.383 | 2.313 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人MIF的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
平均值(pg/ml) | 3502.4 | 802.9 | 201.3 | 2746.2 | 622.7 | 155.1 |
标准差 | 266.2 | 64.2 | 15.7 | 216.9 | 47.9 | 11.6 |
变异系数(%) | 7.6 | 8.0 | 7.8 | 7.9 | 7.7 | 7.5 |
科研工具箱
别称
Macrophage migration inhibitory factor; glycosylation-inhibiting factor; GIF; GLIF; MMIF
基因ID
Gene ID: 4282;Ensembl:ENSG00000240972;MIM:153620;AllianceGenome:HGNC:7097
功能
巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF),也称为糖基化抑制因子(glycosylation-inhibiting factor, GIF)、L-多巴铬异构酶或苯丙酮酸互变酶,是由MIF基因编码的蛋白质。MIF由三个相同的亚基组装成三聚体,每个单体包含两条反平行的α-螺旋和一个由四条β-链组成的β-折叠片,单体环绕着一个具有三重旋转对称性的中央通道分布。CD74是MIF的表面受体,细菌抗原刺激白细胞将MIF释放到血液中,循环中的MIF与其他免疫细胞上的CD74结合,触发急性免疫反应。因此,MIF被归类为炎症细胞因子。MIF与CD74结合,诱导CD74的磷酸化并募集CD44,进而激活非受体酪氨酸激酶,最终导致细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase, ERK)磷酸化。除了ERK,CD74的刺激还激活其他信号通路,如PI3K-Akt、NF-κB和AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)通路。除了CD74,MIF也与趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type 4, CXCR4)、COP9信号体亚基5(COP9 constitutive photomorphogenic homolog subunit 5, COPS5)等分子相互作用。MIF与CXCR4的相互作用可能影响免疫细胞的迁移和定位,从而调节免疫反应;COPS5参与多种细胞过程的调节,包括蛋白质降解和细胞周期控制,MIF与COPS5的相互作用可能在这些过程中发挥调节作用。此外,糖皮质激素也刺激白细胞释放MIF,从而部分抵消糖皮质激素对免疫系统的抑制作用。MIF作为炎性趋化因子,在许多疾病如代谢性疾病(如动脉粥样硬化)、自身免疫病(如类风湿关节炎)、癌症、传染性疾病(如脓毒症)以及伤口愈合中都有非常重要的作用,因此可作为以上疾病的生物标记物或用于研究新的治疗方案。
研究领域
心血管生物学;免疫学;癌症生物学