产品概述
QuantiCyto® Human Dickkopf-1(Dkk-1) ELISA kit
Human
31.3pg/ml
62.5-4000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及部分重组Human Dkk-1浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human Dkk-1
与天然和重组 小鼠、大鼠Dkk-1有交叉反应,与以下细胞因子等无明显交叉反应: Human IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-8 IL-10 IL-12 Dkk-4 Kremen-1 Kremen-2 Mouse Dkk-4 Kremen-1 Kremen-2 LRP-6 Rat Dkk-4 Kremen-1 Kremen-2 LRP-6
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Human Dkk-1单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Human Dkk-1会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Human Dkk-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Human Dkk-1抗体与结合在单抗上的人Human Dkk-1结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Human Dkk-1,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人Human Dkk-1浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出人标本中Human Dkk-1的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 4 ng/支×2 支 | 4 ng/支×3 支 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.075 | 0.079 | 0.077 | |
62.5 |
0.125 |
0.111 | 0.118 | 0.041 |
125 | 0.165 | 0.155 | 0.160 | 0.083 |
250 | 0.247 | 0.229 | 0.238 | 0.161 |
500 | 0.395 | 0.387 | 0.391 | 0.314 |
1000 | 0.741 | 0.717 | 0.729 | 0.652 |
2000 | 1.434 | 1.346 | 1.390 | 1.313 |
4000 | 2.446 | 2.412 | 2.429 | 2.352 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Dkk-1的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
平均值(pg/ml) | 3007.5 | 1505.2 | 501.6 | 2998.4 | 1497.5 | 497.8 |
标准差 | 246.62 | 121.92 | 39.63 | 242.87 | 121.30 | 41.32 |
变异系数(%) | 8.2 | 8.1 | 7.9 | 8.1 | 8.1 | 8.3 |
科研工具箱
别称
DKK1, SK
基因ID
Gene ID: 22943
功能
Dkk-1 是 DKK(Dickkopf)蛋白家族的成员,还包括 Dkk-2、Dkk-3 和Dkk-4。Dkk-1 最初被鉴定为非洲爪蛙头部形成的关键分子,它是一种具有两个富含半胱氨酸区域的分泌蛋白,通过抑制 Wnt 信号通路参与胚胎发育。Dkk-1、-2 和-4 通过与 LRP5/6 结合,阻止 LRP5/6 与Wnt-卷曲受体复合物的相互作用,发挥典型 Wnt 信号拮抗剂的作用。Dkk 蛋白在成人和胚胎组织中有不同的表达模式,对组织发育和形态发生有广泛的影响。DKK-1 表达不足的小鼠在胚胎形成过程中缺乏头部形成并死亡。其他表达位点包括发育中的神经元、毛囊和眼睛的视网膜。Wnt 信号和 Dkk-1 抑制之间的平衡对骨形成和稳态至关重要。骨中 Dkk-1 活性不足或过剩分别导致骨密度增加或降低。在成人中,Dkk-1 在成骨细胞、骨细胞和神经元中表达。脑缺血诱导 Dkk-1表达,导致神经元细胞死亡。在多发性骨髓瘤患者中,骨髓血浆和外周血中 Dkk-1 水平升高,这种 Dkk-1 浓度升高与溶骨性骨病变有关。
研究领域
免疫学;发育生物学; 心血管生物学; 信号转导;