产品概述
QuantiCyto® Human Amphiregulin ELISA kit
Human
31.25 pg/ml
62.5-4000 pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Amphiregulin浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组人Amphiregulin
与以下细胞因子等无明显交叉反应:Human EGF, HB-EGF, EGFR, TGF-α; Mouse Amphiregulin
欣博盛QuantiCyto®ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Amphiregulin单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Amphiregulin会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Amphiregulin抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Amphiregulin抗体与结合在单抗上的人Amphiregulin结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Amphiregulin,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450nm处测OD值,人Amphiregulin浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Amphiregulin的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 以说明书为准 | 以说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.068 | 0.070 | 0.069 | |
62.5 |
0.103 |
0.109 | 0.106 | 0.037 |
125 | 0.123 | 0.129 | 0.126 | 0.057 |
250 | 0.232 | 0.238 | 0.235 | 0.166 |
500 |
0.451 |
0.459 | 0.455 | 0.386 |
1000 | 0.825 |
0.837 |
0.831 | 0.762 |
2000 | 1.436 | 1.442 | 1.439 | 1.370 |
4000 | 2.398 | 2.406 | 2.402 | 2.333 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人Amphiregulin的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
平均值(pg/ml) | 2658.9 | 965.4 | 236.1 | 2036.3 | 898.6 | 203.9 |
标准差 | 218.03 | 70.47 | 18.42 | 156.80 | 63.80 | 15.09 |
变异系数(%) | 8.2 | 7.3 | 7.8 | 7.7 | 7.1 | 7.4 |
科研工具箱
别称
AR, AREGB, CRDGF, SDGF
基因ID
Gene ID:374
功能
双调蛋白(AR 或 AREG)是表皮生长因子家族中的一员,该家族成员还包括表皮生长因子(EGF)、转化生长因子α(TGF-α)、肝素结合表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)、表皮调节素(EREG)和神经调节蛋白(NRGs)等。所有 EGF 家族成员均作为 I 型跨膜前体合成,并在其细胞外区域包含一个或多个 EGF 样结构域。人双调蛋白是一种约50kDa 的跨膜糖蛋白,包含一个 80 个氨基酸(aa)的 N 端前肽、一个肝素结合域、一个 EGF 样结构域、一个 23 个 aa 的跨膜段和一个 31个 aa 的胞内域。成熟的人双调蛋白与小鼠和大鼠双调蛋白的氨基酸序列一致性分别为 78%和 76%。双调蛋白前体的胞外域在蛋白酶的作用下被水解切割,释放出可溶的双调蛋白,这一过程由肿瘤坏死因子α转化酶(ADAM17/TACE)调节。AREG 在多种正常组织和器官中表达,包括胎盘、卵巢、睾丸、子宫、乳腺、胰腺、心脏、骨髓、血液、肾脏、肺、脾脏和小肠等,在初乳和健康人血清中也可检测到。 AREG 参与一系列生理过程,包括女性生殖系统发育、精子发生、胚胎着床、神经元发育、骨组织发育和骨质形成等。AREG 还涉及一系列肿瘤发生和发展过程,在肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭等方面有着重要的调控作用。此外,AREG 参与肿瘤对放疗和对多种化疗药物的抵抗,在放疗抵抗的胰腺癌细胞中,AREG 表达明显升高;AREG 与肿瘤细胞对顺铂的抵抗有关,顺铂耐药的乳腺癌 MCF-7 细胞中 AREG 表达选择性上调。AREG 还与肿瘤细胞对西妥昔单抗或帕尼单抗的抵抗有关。AREG 可以作为肿瘤早期诊断、靶向药物疗效预测及患者预后评价的生物学标志物,也可能成为肿瘤治疗中的潜在靶点。
研究领域
信号转导;癌症生物学