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产品概述
QuantiCyto® Bovine TNF-α ELISA kit
Bovine
62.5 pg/ml
125-8000 pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Bovine TNF-α浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Bovine TNF-α。
与人、恒河猴、小鼠、大鼠、棉鼠、猪、马、猫重组TNF-α等无明显交叉反应。
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗牛TNF-α单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的牛TNF-α会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗牛TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗牛TNF-α抗体与结合在单抗上的牛TNF-α结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有牛TNF-α，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，牛TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中牛TNF-α的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断。
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 4 ng/支×2 支 | 4 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 体稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.082 | 0.084 | 0.083 | |
| 125 | 0.181 | 0.180 | 0.181 | 0.098 |
| 250 | 0.257 | 0.254 | 0.256 | 0.173 |
| 500 | 0.401 | 0.394 | 0.398 | 0.315 |
| 1000 | 0.686 | 0.682 | 0.684 | 0.601 |
| 2000 | 1.196 | 1.194 | 1.195 | 1.112 |
| 4000 | 1.871 | 1.867 | 1.869 | 1.786 |
| 8000 | 2.793 | 2.785 | 2.789 | 2.706 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中牛TNF-α的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
| 平均值（pg/ml） | 6251.3 | 2312.8 | 304.2 | 6001.5 | 2158.9 | 287.1 |
| 标准差 | 487.6 | 173.5 | 24.0 | 480.1 | 166.2 | 21.8 |
| 变异系数（%） | 7.8 | 7.5 | 7.9 | 8.0 | 7.7 | 7.6 |
科研工具箱
别称
DIF; TNFA; TNFSF2; TNLG1F
基因ID
功能
肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor, TNF)-α ， 也称为cachectin 和 TNFSF2，是 TNF 超家族的原型配体。人 TNF-α由 35 个氨基酸(Amino acid, aa)的细胞质结构域、21 个 aa 的跨膜结构域和 177 个 aa 的胞外结构域(Extracellular domain, ECD)组成。在 ECD中，人 TNF-α与恒河猴的氨基酸序列具有 97%的相似度，与牛、犬、棉鼠、马、猫、小鼠、猪和大鼠具有 71- 92 %的相似度。 TNF-α是一种多效型分子，作为一种脂肪因子，TNF-α促进胰岛素抵抗，并与肥胖诱导的Ⅱ型糖尿病有关；作为一种细胞因子，TNF-α被免疫系统用于细胞信号传导，在炎症、细胞凋亡和免疫系统发育中起核心作用。TNF-α可以由多种因素诱导，包括细菌毒素、白介素(interleukin, IL)-1、血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)、干扰素(interferon, IFN) - β、神经生长因子(nerve growth factor, NGF)、肿瘤抑制因子 Oncostatin M 和病毒等的感染，由多种免疫细胞和上皮细胞类型，如单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞、成纤维细胞、T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞产生。 TNFR1 和 TNFR2 是 TNF 信号发生的两个受体类型，TNFR1在大多数细胞类型中组成性表达，而 TNFR2 主要局限于内皮细胞、上皮细胞和免疫细胞亚群。TNFR1 信号倾向于促炎和凋亡，而TNFR2 信号则具有抗炎和促进细胞增殖的作用。抑制 TNFR1 信号传导对自身免疫性疾病的治疗很重要，而 TNFR2 信号传导促进伤口愈合。TNF-α具有广泛的生物学活性，可以杀伤或抑制肿瘤细胞，诱导正常细胞增殖分化，抗感染，促进 IL-1、IL-2 和 IL-6 的产生和分泌，诱发炎症反应，激活嗜中性粒细胞，调节主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex, MHC)Ⅱ类抗原的表达，提高中性粒细胞的吞噬能力。TNF-α也参与许多病理过程，包括哮喘、克罗恩病、类风湿性关节炎、神经病理性疼痛、肥胖、Ⅱ型糖尿病、感染性休克、自身免疫和癌症等。
研究领域
免疫学;信号转导;干细胞与再生医学;微生物学;癌症生物学;心血管生物学;神经科学;代谢生物学;
