产品概述
QuikCyto® Mouse IL-5 ELISA kit(Quick Test)
Mouse
7.8pg/ml
15.6-1000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
2h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Mouse IL-5浓度
不与重组小鼠GM-CSF、IL-3,重组人IL-5、IL-5Rα等反应
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欣博盛ELISA快速检测试剂盒采用双抗体夹心法:抗小鼠IL-5单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的小鼠IL-5会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗小鼠IL-5抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗小鼠IL-5抗体与结合在单抗上的小鼠IL-5结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有小鼠IL-5,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,小鼠IL-5浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠IL-5的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断。
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
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已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.063 | 0.062 | 0.063 | |
15.6 | 0.108 | 0.101 | 0.105 | 0.042 |
31.25 | 0.148 | 0.144 | 0.146 | 0.084 |
62.5 | 0.239 | 0.230 | 0.235 | 0.172 |
125 | 0.413 | 0.409 | 0.411 | 0.349 |
250 | 0.739 | 0.731 | 0.735 | 0.673 |
500 | 1.355 | 0.731 | 0.735 | 0.673 |
1000 | 2.347 | 2.340 | 2.344 | 2.281 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中小鼠IL-5的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
平均值(pg/ml) |
640.5 |
180.8 | 85.7 | 552.6 | 153.9 | 63.4 |
标准差 | 49.32 | 14.46 | 6.51 | 43.10 | 11.85 | 5.01 |
变异系数(%) | 7.7 | 8.0 | 7.6 | 7.8 | 7.7 | 7.9 |
科研工具箱
别称
Il5
基因ID
Gene ID: 16191
功能
白细胞介素-5(IL-5),又称为T细胞替代因子,B细胞生长因子II,嗜酸性粒细胞分化因子,以及嗜酸性粒细胞集落刺激因子,人IL-5主要由活化T细胞产生,小鼠IL-5主要由Th2亚群细胞产生。小鼠IL-5 cDNA编码133个氨基酸残基,包括21个氨基酸的信号肽,信号肽裂解后形成含112个氨基酸残基的成熟序列,天然小鼠IL-5通常以二硫键连接形成同型二聚体,是个分子量为40-45 kDa的糖蛋白。成熟的小鼠IL-5与人的IL-5氨基酸同源性约70%,且在生物学上有交叉反应,小鼠和人IL-5对人细胞系有相同活性作用,而人IL-5在小鼠细胞中的活性比小鼠IL-5低。小鼠IL-5的受体是由α和β两个亚基组成的异源体,两个亚基都属于细胞因子受体超家族I型膜蛋白。α亚基是具有中间亲和力的特异性IL-5受体,β亚基又名AIC2B,是与IL-3,IL-5或GM-CSF的高亲和性受体复合物相同的亚基(βc),βc亚基不直接与IL-5结合,而是通过联合α亚基形成高亲和力的IL-5受体。由于mRNA剪接的不同,已发现有二种可溶性小鼠IL-5Rα亚基,纯化的可溶性小鼠IL-5Rα已经被证明是IL-5的拮抗剂。小鼠IL-5Rα仅在嗜酸性粒细胞,B细胞和肥大细胞中表达,βc亚基在很多造血细胞系中都有表达。IL-5是一种多效细胞因子,它能促进小鼠细胞增殖和分化,提高IgM,IgG1,IgA和IgE的分泌,还能作为化学引诱物,延迟成熟嗜酸性粒细胞存活,刺激小鼠嗜酸性粒细胞的功能,诱导嗜酸性粒细胞的分化,并且和各种集落刺激因子发生协同作用,增加嗜酸性粒细胞产生和扩张。由于其对嗜酸性粒细胞的多种作用,IL-5与哮喘和其它嗜酸性粒细胞增多相关疾病的发病机理密切相关。
研究领域
免疫学;癌症生物学;神经科学