产品概述
QuantiCyto® Human Pappalysin-1/PAPP-A ELISA kit
Human
0.12 ng/ml
0.24-15 ng/mL
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human Pappalysin-1/PAPP-A浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组人Pappalysin-1/PAPP-A。
不与人重组IGFBP-4、IGFBP-5、IGF-I、Pappalysin-2交叉反应。
欣博盛QuantiCyto®ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗人Pappalysin-1/PAPP-A单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的人Pappalysin-1/PAPP-A会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人Pappalysin-1/PAPP-A抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗人Pappalysin-1/PAPP-A抗体与结合在单抗上的人Pappalysin-1/PAPP-A结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有人Pappalysin-1/PAPP-A,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,人Pappalysin-1/PAPP-A浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人Pappalysin-1/PAPP-A的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断。
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 以说明书为准 | 以说明书为准 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
文件下载
实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
Dose(ng/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.064 | 0.066 | 0.065 | |
0.24 | 0.103 | 0.100 | 0.102 | 0.037 |
0.47 | 0.135 | 0.135 | 0.135 | 0.070 |
0.94 | 0.233 | 0.228 | 0.231 | 0.166 |
1.88 | 0.423 | 0.418 | 0.421 | 0.356 |
3.75 | 0.803 | 0.800 | 0.802 | 0.737 |
7.5 | 1.459 | 1.453 | 1.456 | 1.391 |
15 | 2.414 | 2.410 | 2.412 | 2.347 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人PAPP-A的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
平均值(ng/ml) | 8.12 | 2.12 | 0.77 | 7.33 | 1.65 | 0.48 |
标准差 | 0.60 | 0.16 | 0.06 | 0.55 | 0.13 | 0.04 |
变异系数(%) | 7.4 | 7.7 | 7.2 | 7.5 | 8.0 | 7.6 |
科研工具箱
别称
PAPPA; PAPPA1; Pappalysin 1 precursor; Pappalysin-1; Pregnancy Associated Plasma Protein A
基因ID
Entrez Gene: 5069
功能
Pappalysin-1 (PAPP-A)属于 Metzincins 家族,该家族成员包括ADAMs/ADAMTSs,MMPs,Astacins、Serralysins 以及 PAPP-A。 PPAP-A 是一种分泌的金属蛋白酶,通常以二聚体的形式存在,每个单体由两个次单位组成。这些酶活性的次单位在活性位置上包含一个锌离子,在酶活性中发挥关键作用。A 次单位主要负责裂解特定底物,而 B 次单位则用于底物的识别和结合。这两个次单位的协同作用,可使 PAPP-A 通过降解胶原蛋白,尤其是 I 型和 III 型胶原蛋白,产生胰岛素样生长因子结合蛋白(Insulin-like growth factor binding protein,IGFBP)的碎片,包括 IGFBP-4 和 IGFBP-5。当 IGFBP-4 被降解时,它释放了与其结合的胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factor,IGF),从而增加了 IGF 的生物活性,而 IGF 的活性增加通常与胎儿的正常生长和发育相关。因此在妊娠期间,血浆中 PAPP-A 的含量增加约 150 倍,主要功能是促进胎儿发育。此外,PAPP-A 还参与了胚胎在子宫内的植入,有助于胚胎固定在子宫内膜上并继续发育。 PAPP-A 在妊娠早期的降低是唐氏综合征的主要标志。低水平的PAPP-A 也可表明胎盘存在问题,可能导致并发症,如宫内生长受限、妊娠毒血症、胎盘早期剥离、早产甚至死产。因此,PAPP-A 也被用作产前筛查的生物标志物。
研究领域
心血管生物学;细胞生物学