产品概述
QuantiCyto® Human EGFR ELISA kit
Human
7.8pg/ml
15.6-1000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及部分重组Human EGFR浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human EGFR
与以下细胞因子等无明显交叉反应:Human EGF,ErbB3,ErbB2,ErbB4;Mouse EGF
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法:抗Human EGFR单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的Human EGFR会与单抗结合,游离的成分被洗去。加入生物素化的抗Human EGFR抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合;抗Human EGFR抗体与结合在单抗上的Human EGFR结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,若反应孔中有Human EGFR,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色,加终止液变黄。在450 nm处测OD值,Human EGFR浓度与OD450值之间呈正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Human EGFR的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
产品性能
组分
名称 | 48T | 96T |
---|---|---|
抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
冻干标准品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
浓缩生物素化抗体 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩酶结合物 | 1 支(规格见标签) | 1 支(规格见标签) |
酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
显色底物(TMB) | 6 ml×1 瓶 | |
反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
封板胶纸 | 3张 | 6张 |
产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
未开封完整试剂盒 | 4℃,请在保质期内使用 |
---|
已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右,稀释后即用即弃 | |
浓缩酶结合物(避光) | ||
标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
生物素化抗体稀释液 | ||
酶结合物稀释液 | ||
显色底物(避光) | ||
反应终止液 | ||
浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存;若条件不足,也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期,如果仅拿出标准品置于-20℃,其他组分未启用,效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头:0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水,坐标纸等。相关数据
标准曲线
Dose(pg/ml) | Raw Data | Average | Corrected | |
---|---|---|---|---|
0 | 0.087 | 0.083 | 0.085 | |
15.6 |
0.161 |
0.155 | 0.158 | 0.073 |
31.3 | 0.239 | 0.221 | 0.230 | 0.145 |
62.5 |
0.370 |
0.356 | 0.363 | 0.278 |
125 | 0.626 | 0.598 | 0.612 | 0.527 |
250 | 1.009 | 0.993 | 1.001 | 0.916 |
500 | 1.618 | 1.608 | 1.613 | 1.528 |
1000 | 2.636 |
2.586 |
2.611 | 2.526 |
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人EGFR的含量。
重复性
板内,板间变异系数均<10%。
板内重复性 | 板间重复性 | |||||
---|---|---|---|---|---|---|
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
重复次数 | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
平均值(pg/ml) | 801.5 | 421.4 | 105.6 | 842.2 | 402.8 | 114.8 |
标准差 | 51.30 | 30.34 | 7.18 | 59.80 | 29.40 | 7.92 |
变异系数(%) | 6.4 | 7.2 | 6.8 | 7.1 | 7.3 | 6.9 |
科研工具箱
别称
ErbB; ErbB1; ERBB1PIG61; HER1; HER-1; mENA
基因ID
Gene ID:1956
功能
表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR),也称为HER-1、ErbB1或ErbB,是一种跨膜糖蛋白,是酪氨酸激酶受体ErbB家族的四个成员之一。其他的3个成员分别为ErbB2(Neu、HER-2)、ErbB3(HER-3)和ErbB4(HER-4)。所有家族成员都是具有胞外结构域(ECD)的I型跨膜糖蛋白,该结构域包含两个由间隔区隔开的富含半胱氨酸的区域。成熟的人EGFR是一种170kDa的蛋白质,人EGFRcDNA编码一个1210个氨基酸的前体,一个24个氨基酸的信号肽,一个621个氨基酸的胞外区(ECD),一个23个氨基酸的跨膜区和一个542个氨基酸的胞质区。在ECD中,人EGFR与小鼠和大鼠EGFR有88%的氨基酸序列一致性,与人ErbB2、ErbB3和ErbB4的ECD有43%~44%的氨基酸序列一致性。EGFR结合EGF家族配体EGF、双调蛋白(amphiregulin)、TGF-α、β细胞素(betacellulin)、表调蛋白(epiregulin)、HB-EGF和Epigen。这些分子作为跨膜蛋白表达,但通过蛋白水解从细胞表面脱落。配体结合诱导EGFR同二聚化以及与ErbB2、ErbB3或ErbB4的异二聚化。这导致激酶结构域的激活、酪氨酸自磷酸化和受体-配体复合物的激活。EGFR信号调节多种生物功能,包括细胞增殖、分化、运动和凋亡。EGFR的结构、表达和信号传导的改变与多种癌症的发展和转移有关,尤其是上皮起源的癌症。EGFR在多种肿瘤中过度表达,是几种QuantiCyto?EHC095HumanEGFR10抗癌药物的靶点。研究显示宫颈癌和胃癌患者血清中以及鳞状细胞癌患者尿液中可溶性EGFR的水平升高。血清EGFR升高也与晚期结直肠癌化疗的反应性相关,然而在卵巢癌、非小细胞肺癌和头颈癌中血清EGFR会降低。
研究领域
信号转导;细胞生物学;癌症生物学;微生物学;神经科学