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产品概述
QuantiCyto® Human CTLA-4/CD152 ELISA kit
Human
15.6pg/ml
31.25-2000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及部分重组Human CTLA-4浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Human CTLA-4
与以下细胞因子无明显交叉反应：Human B7-1, B7-2, IL-17, CD28. Mouse CTLA-4.
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗Human CTLA-4单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的Human CTLA-4会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗Human CTLA-4抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗Human CTLA-4抗体与结合在单抗上的Human CTLA-4结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有Human CTLA-4，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，Human CTLA-4浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中Human CTLA-4的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存；若条件不足，也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 |
0.073 |
0.079 | 0.076 | |
| 31.25 | 0.111 | 0.117 | 0.114 | 0.038 |
| 62.5 | 0.131 | 0.139 | 0.135 | 0.059 |
| 125 | 0.169 | 0.177 | 0.173 | 0.097 |
| 250 | 0.295 | 0.301 | 0.298 | 0.222 |
| 500 | 0.548 | 0.578 | 0.563 | 0.487 |
| 1000 | 1.142 | 1.148 | 1.145 | 1.069 |
| 2000 | 2.298 | 2.304 | 2.301 | 2.225 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人CTLA-4的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 24 | 24 | 24 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值（pg/ml） | 1547 | 986 | 124 | 1239 | 903 | 107 |
| 标准差 | 122.21 | 71.98 | 9.30 | 87.97 | 69.53 | 7.38 |
| 变异系数（%） | 7.9 | 7.3 | 7.5 | 7.1 | 7.7 | 6.9 |
科研工具箱
别称
CD; GSE; GRD4; ALPS5; CD152; CTLA-4; IDDM12; CELIAC3
基因ID
Gene ID: 1493
功能
细胞毒性 T 淋巴细胞相关蛋白-4 (CTLA-4) ，也称为 CD152，是一种 I 型跨膜 T 细胞抑制分子，属于免疫球蛋白超家族成员。 CTLA-4 基因位于人类 2 号染色体的 q33-q34 带和小鼠 1 号染色体的C 带。人或小鼠 CTLA-4 cDNA 编码 223 个氨基酸，包括 35 个氨基酸信号肽序列、126 个氨基酸胞外结构域(ECD)和一个 Ig 样 V 型结构域、21 个氨基酸跨膜序列和 41 个氨基酸的胞质序列。研究发现人CTLA-4 在胞外结构域是一种 41-43 kDa 的共价同型二聚体，分别与小鼠、大鼠和猪/牛/兔/猫/犬 CTLA-4 有 68%、71%和 83-86%的氨基酸序列同一性。 CTLA-4 和 CD28 具有高度同源性 ， 并且有相同的配体CD80(B7-1) 和 CD86(B7-2)，但它们的功能却截然相反。CTLA-4是一种负性共刺激分子，负责向 T 细胞传递抑制信号，抑制 T 细胞的活性，从而促进免疫逃避。CTLA-4 的作用通过细胞内在和细胞外在机制发生，细胞内在机制包括抑制蛋白质翻译、募集磷酸酶、激活泛素连接酶、抑制细胞因子受体信号传导和抑制 T 细胞膜脂质结构域形成。细胞外部机制包括刺激抑制性吲哚胺(2，3)脱氧酶(IDO)的释放，调节性 T 细胞功能的调节和 CD28 共刺激信号的竞争性抑制。CTLA-4 有超过 100 个与自身免疫和癌症相关的单核苷酸多态性(SNPs)，CTLA-4 启动子中的 SNPs 与多种癌症相关，包括乳腺癌、宫颈癌、结肠直肠癌、头颈癌、肝癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌、肾癌等。CTLA-4 是重要的免疫检查点，是目前肿瘤靶向免疫治疗的热点及方向。
研究领域
免疫学; 微生物学;干细胞与再生医学与再生医学
