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产品概述
QuantiCyto® Canine TNF-alpha ELISA kit
Canine
7.8pg/ml
15.6-1000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Canine TNF-α浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Canine TNF-α
与以下细胞因子等无明显交叉反应：Canine TNF-β, TNF RI, TNF RII, TGF-α, VEGF; Mouse TNF-α, TNF-β, TGF-α, VEGF; Rat TNF-α, TNF-β, TGF-α, HGF
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗Canine TNF-α单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的Canine TNF-α会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入酶标抗体，抗Canine TNF-α抗体与结合在单抗上的Canine TNF-α结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有Canine TNF-α，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，Canine TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中Canine TNF-α的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断。
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 0.6 ng/支×2 支 | 0.6 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存；若条件不足，也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.062 | 0.064 | 0.063 | |
| 15.6 | 0.112 | 0.118 | 0.115 | 0.052 |
| 31.3 | 0.165 | 0.173 | 0.169 | 0.106 |
| 62.5 | 0.257 | 0.271 | 0.264 | 0.201 |
| 125 | 0.489 | 0.499 | 0.494 | 0.431 |
| 250 | 0.886 | 0.892 | 0.889 | 0.826 |
| 500 | 1.539 | 1.553 | 1.546 | 1.483 |
| 1000 | 2.622 | 2.638 | 2.630 | 2.567 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中犬TNF-α的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 16 | 16 | 16 | 12 | 12 | 12 |
| 平均值（pg/ml） | 835.1 | 411.7 | 100.4 | 807.3 | 400.8 | 99.1 |
| 标准差 | 68.48 | 31.70 | 7.33 | 63.78 | 28.86 | 7.73 |
| 变异系数（%） | 8.2 | 7.7 | 7.3 | 7.9 | 7.2 | 7.8 |
科研工具箱
别称
DIF; TNFA; TNFSF2; TNLG1F; TNF-alpha
基因ID
Gene ID: 403922
功能
肿瘤坏死因子α (Tumor necrosis factor alpha, TNF-α)，又称恶病质素（cachectin），是 TNF 超家族的原型配体。TNF-α是一种多效性分子，在炎症、细胞凋亡和免疫系统发育中发挥中心作用。TNF-α是由多种免疫和上皮细胞类型产生的。人 TNF-α由一个 35 氨基酸(aa)胞质结构域，一个 21 氨基酸跨膜段和一个 177 氨基酸胞外结构域(ECD)组成。在 ECD 中，人类 TNF-α与恒河猴有 97%的 aa 序列同源性，与牛、犬、棉鼠、马、猫、小鼠、猪和大鼠 TNF-α有 71% - 92%的同源性。26kda 的 II 型跨膜蛋白在细胞内组装，形成非共价连接的同型三聚体。这种复合物的连接诱导反向信号，促进淋巴细胞共刺激，但减少单核细胞的反应性。TACE/ADAM17 切割膜结合 TNF-α释放出 55kda 可溶性 TNF-α三聚体形式, TNF-α三聚体结合 TNF- RI和 TNF- RII 进行下游信号传导。TNF-α通过控制细胞凋亡调控淋巴组织的发育。TNF-α通过诱导血管内皮细胞和巨噬细胞的活化来促进炎症反应。TNF-α通过影响胰岛素抵抗和脂肪酸代谢而促进 II 型糖尿病的发展。
研究领域
免疫学;信号转导;干细胞与再生医学;微生物学;癌症生物学;心血管生物学;神经科学;代谢生物学;
