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产品概述
QuantiCyto® Human TNF-α ELISA kit (High Sensitivity)
Human
1.95pg/ml
3.9-250pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Human TNF-α浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组人TNF-α
与以下细胞因子等无明显交叉反应：Human：IL-2，IL-4，IL-5，IL-6，IL-8，IL-10，IL-12，TNF RI，TNF RII，TNF-β；Mouse ：IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，TNF-α，TNF RI，TNF RII；Rat：TNF-α
欣博盛 QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗人TNF-α单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人TNF-α会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人TNF-α抗体与结合在单抗上的人TNF-α结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人TNF-α，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，人TNF-α浓度与 OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人TNF-α的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断。
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存；若条件不足，也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.066 | 0.067 | 0.067 | |
| 3.9 | 0.113 | 0.111 | 0.112 | 0.046 |
| 7.8 | 0.185 | 0.183 | 0.184 | 0.118 |
| 15.6 | 0.300 | 0.296 | 0.298 | 0.232 |
| 31.3 | 0.513 | 0.507 | 0.510 | 0.444 |
| 62.5 | 0.889 | 0.881 | 0.885 | 0.819 |
| 125 | 1.566 | 1.562 | 1.564 | 1.498 |
| 250 | 2.614 | 2.607 | 2.611 | 2.544 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中人TNF-α的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值（pg/ml） | 188.6 | 64.3 | 10.1 | 201.6 | 88.3 | 7.7 |
| 标准差 | 14.3 | 4.8 | 0.8 | 15.9 | 6.8 | 0.6 |
| 变异系数（%） | 7.6 | 7.4 | 8.0 | 7.9 | 7.7 | 8.1 |
科研工具箱
别称
DIF; TNFA; TNFSF2; TNLG1F
基因ID
Gene ID: 7124
功能
肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α , TNF-α)是一种具有多功能的细胞因子，在炎症反应、细胞免疫、细胞凋亡和脂质代谢中发挥重要作用。人 TNF-α前体由 233 个氨基酸组成(26 kDa)，其中包含由76 个氨基酸残基组成的信号肽，在 TNF 转化酶 TACE 的作用下，切除信号肽，形成成熟的 157 个氨基酸残基的 TNF-α(17 kDa)。在胞外结构域中，人 TNF-α与恒河猴的氨基酸序列具有 97%的同一性，与牛、犬、棉鼠、马、猫、小鼠、猪和大鼠 TNF-α序列具有 71%-92%的同一性。TNF-α来源极广泛，体内多种细胞如单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、内皮细胞和角质细胞等均可产生和释放 TNF-α。TNF 受体有 2 种，I 型(TNFR1)分子量为 55 kD，Ⅱ型(TNFR2)为 75 kD，在多种细胞中表达，介导细胞凋亡的主要是 TNFR1。TNF-α以三聚体的形式与靶细胞上 3 分子 TNFR 结合而使受体激活。 TNF-α具有广泛的生物学活性，可以杀伤或抑制肿瘤细胞，诱导正常细胞增殖分化，抗感染，促进 IL-1、IL-2 和 IL-6 的产生和分泌，诱发炎症反应，激活嗜中性粒细胞，调节 MHCⅡ类抗原的表达，提高中性粒细胞的吞噬能力。TNF-α也参与许多病理过程，包括哮喘、克罗恩病、类风湿性关节炎、神经病理性疼痛、肥胖、2 型糖尿病、感染性休克、自身免疫和癌症等。
研究领域
免疫学;信号转导;干细胞与再生医学;微生物学;癌症生物学;心血管生物学;神经科学;代谢生物学;
