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产品概述
QuikCyto® Rat TNF-α ELISA kit (Quick Test)
Rat
31.25pg/ml
62.5-4000pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
1.5h~2h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Rat TNF-α浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组Rat TNF-α
与以下细胞因子等无明显交叉反应：Human TNF-α，TNF-β，TNF RI，TNF RII；Mouse IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，TNF RI，TNF RII；Rat IL-1β，IL-2，IL-4，IL-6，IL-10，IFN-γ，PDGF-BB
欣博盛ELISA快速检测试剂盒采用双抗体夹心法：抗大鼠TNF-α单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的大鼠TNF-α会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗大鼠TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗大鼠TNF-α抗体与结合在单抗上的大鼠TNF-α结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有大鼠TNF-α，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，大鼠TNF-α浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中大鼠TNF-α的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断。
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 3.2 ng/支×2 支 | 3.2 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 标准品&标本通用稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
冻干标准品推荐于-20℃保存；若条件不足，也可保存于4℃。
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。
相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.074 | 0.068 | 0.071 | |
| 62.5 | 0.118 | 0.114 | 0.116 | 0.045 |
| 125 | 0.164 | 0.166 | 0.165 | 0.094 |
| 250 | 0.257 | 0.259 | 0.258 | 0.187 |
| 500 | 0.474 | 0.477 | 0.476 | 0.405 |
| 1000 | 0.791 | 0.794 | 0.793 | 0.722 |
| 2000 | 1.423 | 1.427 | 1.425 | 1.354 |
| 4000 | 2.587 | 2.590 | 2.589 | 2.518 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中大鼠TNF-α的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 10 | 10 | 10 | 8 | 8 | 8 |
| 平均值（pg/ml） | 2310.6 | 942.5 | 320.4 | 2110.5 | 920.3 | 308.7 |
| 标准差 | 175.61 | 69.75 | 24.03 | 170.95 | 71.78 | 24.08 |
| 变异系数（%） | 7.6 | 7.4 | 7.5 | 8.1 | 7.8 | 7.8 |
科研工具箱
别称
Tnfa; RATTNF; TNF-alpha
基因ID
Gene ID: 24835
功能
肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor alpha, TNF-α)也称为恶病质素(cachectin)和TNFSF1A，是一种多效性的细胞因子，在炎症、细胞凋亡和免疫系统发育过程中发挥重要作用。TNF-α可由多种免疫细胞和上皮细胞产生。大鼠TNF-α由35个氨基酸氨基的胞内结构域、21个氨基酸残基的跨膜区以及179个氨基酸组成的胞外结构域组成。 其中，胞外结构域与小鼠具有94%的氨基酸序列同一性，与牛、犬、马、猫、人、猪和恒河猴具有69-76%的序列同一性。该26kDa的II型跨膜蛋白在胞内组装形成非共价连接的同源三聚体。复合体的结合可诱导反向信号传导，促进淋巴细胞共刺激，减弱单核细胞的应答。 膜结合型TNF-α经TACE/ADAM17裂解可释放出55kDa的可溶性TNF-α三聚体。TNF-α与泛表达的TNF RI和造血细胞限制性的TNFRII结合。TNF RI和TNF RII均以同源三聚体形式表达。TNF-α通过控制细胞凋亡从而调节淋巴组织的发育。TNF-α还可通过诱导活化血管内皮细胞和巨噬细胞促进炎症反应应答。TNF-α是多种炎症性疾病发展中的一个关键性细胞因子，国外大量报道提示TNF-α可能是胰岛素抵抗发病机制中的重要中介环节。体内及体外试验均证明TNF-α可干扰周围组织胰岛素作用致胰岛素抵抗。
研究领域
免疫学;信号转导;干细胞与再生医学;微生物学;癌症生物学;心血管生物学;神经科学;代谢生物学;
