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产品概述
QuantiCyto® Mouse Complement Component C5a ELISA kit
Mouse
7.8 pg/ml
15.6-1000 pg/ml
双抗体夹心法
比色法
血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等
100 μl/well
3.5h
用于体外定量检测血清、血浆或其他适用样品中天然及重组Mouse C5a浓度
本试剂盒特异性识别天然和重组小鼠Complement Component C5a
与以下细胞因子等无明显交叉反应：Recombinant human C3a, Recombinant human C5a, Recombinant mouse C3d, Natural Human a2-Macroglobulin.
欣博盛QuantiCyto® ELISA试剂盒采用双抗体夹心法：抗小鼠Complement Component C5a单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的小鼠Complement Component C5a会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗小鼠ComplementComponentC5a抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗小鼠Complement Component C5a抗体与结合在单抗上的小鼠Complement Component C5a结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有小鼠ComplementComponent C5a ，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450 nm处测OD值，小鼠omplement Component C5a浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中小鼠Complement Component C5a的浓度。
本产品仅供科研使用、不用于临床诊断。
产品性能
组分
| 名称 | 48T | 96T |
|---|---|---|
| 抗体预包被酶标板 | 8×6 | 8×12 |
| 冻干标准品 | 1 ng/支×2 支 | 1 ng/支×3 支 |
| 标准品&标本通用稀释液 | 12 ml×1 瓶 | 20 ml×1瓶 |
| 浓缩生物素化抗体 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 生物素化抗体稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩酶结合物 | 1 支（规格见标签） | 1 支（规格见标签） |
| 酶结合物稀释液 | 10 ml×1 瓶 | 16 ml×1 瓶 |
| 浓缩洗涤液20× | 25 ml×1 瓶 | 50 ml×1 瓶 |
| 显色底物（TMB） | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 反应终止液 | 6 ml×1 瓶 | 12 ml×1 瓶 |
| 封板胶纸 | 3张 | 6张 |
| 产品说明书 | 1份 | 1份 |
运输温度
冰袋存放说明/保质期
| 未开封完整试剂盒 | 4℃，请在保质期内使用 | |
|---|---|---|
| 已开封试剂盒 | 抗体包被板条 | 未用完的板条放回带拉链铝箔袋封口 |
| 标准品 | 负20℃可储存 6 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩生物素化抗体 | 4℃可储存 1 个月左右，稀释后即用即弃 | |
| 浓缩酶结合物（避光） | ||
| 体稀释液 | 4℃可储存 1 个月左右 | |
| 生物素化抗体稀释液 | ||
| 酶结合物稀释液 | ||
| 显色底物（避光） | ||
| 反应终止液 | ||
| 浓缩洗涤液20× |
已开封试剂盒效期特指试剂开盖后效期，如果仅拿出标准品置于-20℃，其他组分未启用，效期同未开封完整试剂盒。
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实验所需自备器材
1. 酶标仪(450 nm波长滤光片)。 2. 进口品牌高精度加液器及一次性吸头：0.5-10 ul, 2-20 ul, 20-200ul, 200-1000 ul。 3. 37 ℃恒温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸等。
相关数据
标准曲线
| Dose（pg/ml） | Raw Data | Average | Corrected | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 0.077 | 0.078 | 0.078 | |
| 15.6 | 0.183 | 0.181 | 0.182 | 0.105 |
| 31.25 | 0.270 | 0.266 | 0.268 | 0.191 |
| 62.5 | 0.388 | 0.384 | 0.386 | 0.309 |
| 125 | 0.600 | 0.596 | 0.598 | 0.521 |
| 250 | 0.957 | 0.953 | 0.955 | 0.878 |
| 500 | 1.521 | 1.517 | 1.519 | 1.442 |
| 1000 | 2.364 | 2.344 | 2.354 | 2.277 |
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本中小鼠ComplementComponentC5a的含量。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
| 板内重复性 | 板间重复性 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| 重复次数 | 20 | 20 | 20 | 16 | 16 | 16 |
| 平均值（pg/ml） | 885.3 | 221.8 | 53.7 | 623.1 | 143.9 | 22.5 |
| 标准差 | 68.2 | 17.5 | 4.3 | 48.6 | 10.9 | 1.8 |
| 变异系数（%） | 7.7 | 7.9 | 8.1 | 7.8 | 7.6 | 8.0 |
科研工具箱
别称
C5; He; C5a; Hfib2
基因ID
Gene ID: 15139(Mouse)
功能
补体成分5a(Complement Component 5a)是补体蛋白C5被C5转化酶切割后产生的片段之一。它是一种促炎性肽，能激活补体系统、促进MAC形成、吸引免疫细胞，并参与过敏反应中的组胺释放。C5a在先天免疫中至关重要，并与适应性免疫相关。其过量产生与多种炎症性疾病相关。 C5a是一种类过敏毒素，能导致内皮细胞上粘附分子的表达增加、平滑肌收缩以及血管通透性增加。C5a des-Arg（C5a的衍生物）是一种效力较弱的类过敏毒素，C5a和C5a des-Arg都能触发肥大细胞脱颗粒，释放促炎分子组胺和肿瘤坏死因子α(TNF-α)。C5a还是一个有效的趋化因子，促进感染部位补体和吞噬细胞的积累或将抗原呈递细胞招募到淋巴结。C5a在增加中性粒细胞和单核细胞向血管壁的迁移和粘附中起着关键作用。C5a还调节白细胞上激活与抑制性IgG Fc受体之间的平衡，从而增强自身免疫反应。 作为一种关键的炎症介质，C5a是许多涉及补体系统的炎症疾病发展进程重的关键因素，如败血症、类风湿性关节炎等。C5a的抑制剂可能有助于治疗这些疾病。PMX53或PMX205是针对C5a受体CD88的特异性药物，能够减轻炎症。C5a在败血症中性粒细胞功能障碍中起核心作用，抗体阻断C5a可改善实验模型和患者的预后。此外，C5a还影响中性粒细胞的吞噬和成熟，改变其对细菌的磷酸化蛋白组反应，并通过形成中性粒细胞胞外陷阱和释放细胞毒性组蛋白，参与ARDS和肿瘤生长转移的病理过程。
研究领域
免疫学；代谢生物学
